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論如何處理Waters色譜耗材的污染問題
   論如何處理Waters色譜耗材的污染問題
  Waters色譜耗材的柱效是Waters色譜耗材在色譜分離過程中主要由熱力學因素所決定的分離效能。通常用理論塔板數表示。柱效是衡量Waters色譜耗材性能的一項主要指標,柱效越高,分離能力越強。
  柱效測試方法可以根據每根Waters色譜耗材附帶的測試報告提供的方法條件進行試驗。通常實際測試結果比Waters色譜耗材所附的測試報告結果偏低是正常的。因為儀器公司測試塔板數的HPLC系統是專門設計的,整個系統擴散體積非常小。
  如果新柱測試結果與報告中有很大不同,很大可能是由于色譜系統配置以及死體積等因素的影響。需要考慮不同柱外體積的影響:
  柱外體積是指“額外”或“外部”(相對于Waters色譜耗材)體積,是系統的一部分,尤其是各LC部件、Waters色譜耗材之間的連接管線體積、進樣體積和流通池體積。
  對于各部件的連接管線,為了減少體積可以使用更小內徑的管線。
  下面的例子就顯示了柱外體積的影響。當使用較小的柱子時,10ml的柱外體積可以得到良好的分離結果,當加上一段管線形成50mL的柱外體積,色譜峰變寬、分離度降低。在向系統中添加體積不明的管線時,這種情況經常發生。添加一段太長的管線,或內徑較大的短管時,會使柱效Waters色譜耗材的分離度變差。
  不同內徑的管線對色譜峰展寬的影響。管線內徑越大,樣品譜帶在管線內發生的擴散也就越da,色譜峰展寬也就越嚴重。當然,內徑越大,同等長度的管線帶進去的柱外體積也越大。
  原則上,系統的大柱外體積(管線體積、進樣體積和檢測器體積)不應超過柱體積的10%。
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